为了继承父亲帝野熊五郎（小山力也配音）的遗嘱，高中生帝野将悟（樱井孝宏配音）进入了贵族学校深流院学园学习如何成为一个合格社长，不仅如此，在接下来的两年中，将悟还必须在学园中找到可以托付一生的结婚伴侣。这可难倒了个性普通的将悟，不过，世上无难事，将悟愉快的高中生活就要开始了。在生日的当天，将悟接到了一个自称是“妹妹”的女孩打来的电话，然而这位妹妹究竟是谁，将悟毫无头绪。在学园中，将悟结识了许多可爱的女孩子，有学级委员鹤真心乃枝（石原夏织配音），沉默害羞的神凪雅（佐仓绫音配音），高智商少女嵯峨良芽衣（日高里菜配音）等人，而将悟感觉到，那个神秘的妹妹，就藏在这些花朵般柔软的女孩子们之中。

《三人行必有我妹》是一部以校园生活为背景的轻松幽默的日本动漫作品，讲述了主人公若叶津雪和他的两位妹妹之间的故事。以下是剧情介绍：

故事发生在一所普通的高中，主角若叶津雪是一个普通的高中生，他有两个妹妹，分别是年长的若叶小雪和年幼的若叶小夏。虽然他们是兄妹，但三人之间的关系却十分特别，充满了欢笑和温情。

若叶津雪是一个非常普通的高中生，他并没有什么特别的优点，也没有过人的才华，但他却有着一颗善良、乐观的心。他喜欢帮助别人，乐于助人，是班级里的大家长。虽然他有时会因为天然呆而搞出一些笑话，但却总能化解尴尬，让大家开怀大笑。

若叶小雪是若叶津雪的大妹妹，她是一个性格开朗、活泼可爱的女孩。她喜欢运动，尤其是篮球，是校篮球队的队长，同时她也是学校的学霸，成绩优异。尽管她有时会对若叶津雪和若叶小夏施加一些严厉的管教，但她却是一个非常疼爱他们的姐姐，时常为他们着想。

若叶小夏是若叶津雪的小妹妹，她是一个天真可爱、活泼可爱的女孩。她喜欢画画和玩游戏，是个典型的宅女。虽然她有时会因为调皮捣蛋而惹出一些麻烦，但她却总能用她的可爱和机智化解问题，让人忍不住喜欢她。

在这个普通的高中里，若叶津雪和他的两个妹妹经历了许多有趣的事情。他们一起参加学校的各种活动，一起度过了许多快乐的时光。虽然他们之间会因为一些小事而产生争执，但他们的关系却始终十分紧密，无论遇到什么困难，他们都会互相支持，共同克服。

在这个充满欢笑和温情的故事中，若叶津雪和他的两个妹妹展现了兄妹之间特有的羁绊和情谊，让人感受到了家庭的温暖和幸福。这部动漫通过轻松幽默的方式，展现了青春期兄妹之间的友爱和成长，深受观众喜爱。